分光光度計注意事項和影響顯色反應的因素

分光光度計是各種實驗室檢測核酸或者蛋白等樣品濃度常用的儀器之一。選擇可見和紫外可見分光光度計時關鍵的指標有三點：一是波長范圍，二是波長準確度，三是雜散光參數。波長范圍的選擇是由用戶實驗需要所定，波長范圍越寬的價格越貴。波長準確度及雜散光參數的數值越低，表示性能越好。

723N可見分光光度計

754N 紫外可見分光光度計

一、分光光度計儀器注意事項

1、分光光度計應該放到較干燥的房間內，使用時放置在堅固平穩的工作臺上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發亮不穩定。

2、使用儀器前，使用者應該首先了解儀器的結構和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。

3、在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關。

4、在儀器尚未接通電源時，電表指針必須于“0”刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進行調節。

5、保持分光光度計清潔、無污染，是成功操作的關鍵。

二、影響顯色反應的主要因素

將試樣中被測組分轉變成有色化合物的化學反應叫顯色反應。分光光度法一般用于微量組分的測定，故一般選擇生成有色化合物的、吸光度高的顯色反應。但靈敏度高后，反應不一定選擇性好，故應全面加以考慮。對于高含量組分的測定，不一定選用最靈敏的顯色反應。

影響顯色反應的主要因素有以下幾點：

1、顯色劑用量：通過實驗來確定適用量；

2、反應液的酸堿度（pH）。溶液酸堿度直接影響金屬離子與顯色劑存在形式以及有色化合物組成的穩定性；

3、反應溫度：不同的顯色反應需要不同的反應溫度，一般顯色反應可在室溫下完成；

4、顯色反應時間：顯色反應的速度有快有慢；

5、干擾離子的影響：應采用適當方法消除其影響。